ARJENTAFFİN GRANÜLLER İÇİN MASSON-FONTANA YÖNTEMi
Fenolik bileşiklerin gümüş çözeltilerinin metalik gümüşe indirgeme kapasiteleri vardır. Direkt indirgeme (arjentaffin reaksiyon) sadece alkolsiz fiksasyondan sonra ortaya çıkabilir. Ek bir indirgeyici maddenin kullanıldığı herhangibir gümüş çöktür¬me tekniği arjentaffin ve argirofil hücreleri siyahlaştıracaktır.
Fiksasyon: Formal-salin veya formalin içeren fiksatifler. Alkol veya alkollü fiksatifler kullanılmamalıdır.
Kesitler: Parafin
Fontana Çözeltisi
% 10' luk gümüş nitrat 20 cc
Konsantre amonyak
Distile su 20cc
Gümüş nitrat üzerine damla damla konsantrik amonyak sadece çözeltide hafif bir çökelti kalana kadar damlatılır. 20 cc distile su eklenir. Çözelti taze olarak kul-lanılmalıdır, fakat kahverengi şişede birkaç gün dayanabilir.
Hexamine gümüş çözeltisi
Stok çözelti: % 5' lik 5 cc gümüş nitrat çözeltisi, % 3’1ik 100 cc hexamine çözeltisi eklenir. Beyaz renkli tortu kaybolana kadar çalkalayın. Kullanım için, 100 cc hexamin gümüş çözeltisine pH=7.8 olan 25 cc borik asit-borate tamponunu ekleyin. Stok gümüş çözeltisi buzdolabında birkaç ay dayanır.
pH=7. 8 olan borik asit-borat tamponunun hazırlanışı
1/5 M borik asit : 12.4 gr borik asidi distile suda çözün ve 1 litreye tamamlayın.
1/20 M sodyum tetraborate (boraks):19.1 gramını distile suda çözün ve 1 litreye tamamlayın.
160 cc 1. çözelti + 40 cc 2. çözelti eklenerek tampon hazırlanır.
1.Parafin kesitleri suya indirin
2.10 dakika Gram’ ın iodine ile muamele edin
İodine kristali .......................... l gr
Potasyum iodide.......................2 gr
Distile su......................................300 cc
3. % 5' lik sodyum tiyofosfat’ ta............... 2 dakika
4-Birçok defa ayrı ayrı kapta distile su ile çalkalayın
5-İki gümüş çözeltisinin birinde, karanlıkta ve ağzı kapalı kavanozda 1 gece boyayın
6.Birçok kez ayrı ayrı kapta distile su ile çalkalayın
7.% 0.2’ lik altın klorid ile yaklaşık 2 dakika renklendirin
8-Distile suda çalkalayın
9-% 5’lik sodyum tiosülfat ile 2 dakika
10-Akarsuda çalkalama 2 dakika
11.%0.1’ lik safranin veya % 1’ lik nötral red ile 2 dakika boyama
12.Suda yıkama
13.% 70’ lik alkolde differensiye edilir.
14.Alkollerle dehidrasyon
15.Şeffaflandırma
16.Kapatma
SONUÇLAR
Melanin.............................. siyah
Arjentaffin granülleri.....gri-siyah (karsinoid tümörlerin granülleri kahverenkli olabilir)
Çekirdekler...................kırmızı
Açıklamalar
1-İodin sülfidril gruplarından dolayı ortaya çıkacak olan yanlış reaksiyonları önlemektedir. Civa ile tespit edilen dokulardan civanın uzaklaştırılmasını da sağlar. 2. ve 3. İşlem basamaklarını uygulamak zorunlu değildir.
2-Fontana çözeltisi siyah gümüş granüllerini kesit üzerine çöktürür. Heksamin gümüş çözeltisine göre non-spesifik siyah fon vermeye daha hassastır.
3-İntestinal epiteldeki arjentaffin hücre granüllerine ek olarak kromaffin granülleri ve lipofuksinler değişik yoğunluklarda pozitif gümüş reaksiyonları verebilir.
4-Gümüş çözeltileri patlayıcı olabilir, dikkat edilmelidir.
5-Altın kloridleme işlemi isteğe bağlıdır, uygulanmayabilir.
Histoloji
-
Endosülfan ve okratoksin-A’nın birlikte sıçanlarda toksisitesi: histopatolojik değişiklikleri
-
Histoloji Pdf Ders Notları
-
DEKALSİFİYE EDİLMEMİŞ KESİTLERİN HAZIRLANIŞI
-
DEKALSİFİKASYONU TEST ETMEK
-
KELATLAMA AJANLARI
-
ELEKTROLİTİK DEKALSİFİKASYON
-
ASİT DEKALSİFİKASYON SIVILARI
-
Histopatoloji nedir ?
-
KEMİK DOKUSU VE DEKALSİFİKASYON
-
MSS’DE DEJENERE MİYELİNİN GÖSTERİMİ
-
MARKSCHE’DEN BOYASI (Spielmayer, Benda)
-
MSS‘DE MİYELİNİN GÖSTERİMİ
-
KARIŞIK OLAN TEKNİK
-
BİELSCHOWSKY TEKNİĞİ
-
GÜMÜŞ ÇÖKTÜRME YÖNTEMLERİ
