Biyologlar - Biyolojiye Gerçekçi Yaklaşım

Ençok kullanılan yöntem, kalsiyum tuzlarını asit çözeltisinde çözmektir. Birçok yöntem olmasına karşın en çok nitrik asit, formik asit ve trikloroasetik asit karışımları kullanılmaktadır.
1-Nitrik Asit: Çok hızlı dekalsifiye eder fakat dokuda harabiyete yol açar ve uygulama uzun olduğunda çekirdek boyamasını inhibe eder. Bu nedenle küçük parçaların hızlı dekalsifikasyonunda kullanılırlar.
Tespit edilmiş küçük kemik parçaları distile su ile taze hazırlanmış %5-10 ‘luk nitrik aside konurlar. 4 saat sonra ve kısa aralıklarla dekalsifikasyon kontrol edilir. Dekalsifikasyon 48 saati aşmamalıdır. Bazen formalin, maserasyona ve şişmeye karşı dokuyu korumak amacı ile nitrik aside eklenir. Dekalsifikasyondan sonra dokular direkt olarak %70’lik alkole aktarılırlar. Su ile yıkamaya gerek yoktur çünkü fazla asit dehidratasyon sırasında uzaklaşacaktır. Daha az etkili fakat rutin amaçlar için yararlı bir dekalsifikasyon sıvısı Perenyi’nin nitrik asit, kromik asit ve alkol karışımıdır.
Perenyi sıvısının hazırlanışı:
• %10’luk nitrik asit .................................40 cc
• Absolü alkol .................................30 cc
• %0,5’lik kromik asit................................30 cc
Çözeltisi taze olarak kullanılmalıdır ve dekalsifikasyondan sonra direkt olarak %70’lik alkole aktarılmalıdır.
2-Formik asit: Nitrik asitten daha yavaş etki yapar, dokuya daha az zarar verir ve boyamayı fazla etkilemez. Rutin kullanım için distile su ile hazırlanmış %10’luk formik asit tavsiye edilir. Daha yüksek kontrasyonlar (%30’luğa kadar) daha hızlı dekalsifikasyonu sağlarken, boyamada bozulma olabilir. Dekalsifikasyon sıvısı çok bol olmalı ve 48 saatte bir yenilenmelidir. Küçük süngerimsi kemik parçaları 2 günde, daha büyük, dens kompakt kemikler ise 20 günde dekalsifiye olurlar. Dekalsifikasyondan sonra parçalar direkt olarak %70’lik alkole aktarılırlar.
Evans ve Krajian’ın formik asitli çözeltisi daha hızlıdır ve iyi bir boyanabilirlik sağlamaktadır. Kısmen modofiye edilmiş formülü aşağıdaki gibidir. Dokular dekalsifikasyondan hemen sonra %70’lik alkole aktarılır.
• Formik asit..................... 35 cc
• %20 ‘lik sodyum sitrat.....65 cc
4-Trikloroasetik asit: Özellikle dişlerin dekalsifikasyonu için önerilmektedir. Trikloroasetik asitin %5’lik sulu çözeltisi taze olarak hazırlanır. Aynı konsantrasyondaki formik asitten kısmen daha hızlı hareket eder. Boyama sonuçları iyidir. Parçalar dekalsifikasyondan sonra direkt olarak %70’lik alkole aktarılır.

5- Kemik Preparatlar İçin Dekalsifikasyon Çözeltisi
Formik asit 100 cc
HCl 80 cc
Distile su 1000 cc