PCR (POLİMERAZ ZİNCİR REAKSİYONU)
Standart PCR Reaksiyon Karışımı: Çalışılan standart PCR karışımı (25 µl) aşağıdaki şekilde hazırlanır. Reaksiyonların tamamı 30 döngü uygulanır.
Tablo 1. PCR Reaksiyon Bileşenleri
Bileşen Hacim Final Konsantrasyonu
Otoklavlanmış-filtre 20.7 µl -
edilmiş su (pH 7.0)
2- 10 X PCR Tampon* 2.5 µl 1 X
3 - dNTP karışımı (herbir 0.2 µl 200 µM (herbir nükleoti
nükleotidden 25 mM)
Primer karışımı (herbir 0.4 µl 0.4 µM (herbir primer)
primerden 25 pmol/µl)
Taq DNA polimeraz 0.2 µl 1 ünit/25 µl
(native enzim=doğal yapıda enzim)
6- Genomik DNA kalıbı 1.0 µl 100 ng/µl (100 ng/µl)
*PCR tamponu satıcının (Perkin Elmer Cetus) tavsiyesi üzerine kullanılmıştır.
10 X Tampon : 500 mM KCl, 100 mM Tris-HCl (pH 8.3), 15 mM MgCl2 (PCR karışımında bu maddelerin final konsantrasyonları şöyledir : 50 mM KCl, 10 mM Tris-HCl, 1.5 mM MgCl2)
Yukarıda miktarı belirtilen tampon daha fazla hazırlanabilir (10-15 ml) ve bu tampon tüplerde –20 oC’de uzun süre saklanabilir.
Genel Biyoloji
-
Protista Alemi ve Genel Özellikleri
-
Hücrelerdeki farklı ve benzer yapılar
-
Ses Nedir ? Ses Nasıl Oluşur?
-
Kültürü Yapılan Fitoplankton Türleri Nelerdir?
-
Apoptoz: Programlı Hücre Ölümü Nedir?
-
Ribozom ve Protein Sentezi
-
Mikrotübüller ve İplikçikler
-
Hücre Zarları
-
Lipid Çift-Katmanın Keşfi
-
Biyoreaktör
-
Telomerler ve İnsan Telomerinin Kristalik Yapısı
-
Hücre Biyolojisinin Tarihsel Gelişimi
-
Hücre biyolojisi nedir ?
-
Biyolojik Çeşitlilik Nedir ?
-
Sinir Sistemi Yapısında Bulunan Hücre Tipleri ve Özellikleri Nelerdir?