Kreatinin tayini
Kreatinin, kreatin’in anhidrit seklidir.Kreatin bobrek, karaciger ve pankreasta sentezlenir. Sentez olayinda iki enzim rol oynar: Glisin amidinotransferaz ve S-adenozilmetiyonin:guanidoasetat N-metiltransferaz. 1.reaksiyon mitokondride, 2. Reaksiyon sitoplazmada gerceklesir.
1-Arginin + Glisin Û Ornitin + Guanidoasetat
2-guanidoasetat + S.-adenozilmetiyonin Û Kreatin + S-adenozil homosistein
Sentezlenen kreatin kan yoluyla beyin ve cizgili kaslara tasinir ve burada kreatin fosfat olarak depo edilir.
Kreatin + ATP Û Kreatin-P + ADP
Bu reaksiyonu kreatin kinaz (CK) katalizler.Kreatin-P, ozellikle kas kasilmasi sirasinda enerjiye (ATP) gereksinim aninda CK reaksiyonunun tersine donmesiyle ATP saglar. Serbest kreatin’in bir kismi kendiliginden bir molekul su kaybederek kreatinin’e donusur.Olusan kreatinin bobrek yoluyla itrah edilir.
Her bireyde gunluk kreatinin itrahi hemen hemen sabittir.Idrar kreatinini bireyin kas kutlesi ile dogrudan ilgilidir.Buna kreatinin katsayisi denir.
Kreatinin katsayisi=....mg kreatinin /24 s/kg vucut agirligi olarak ifade edilir.Erkeklerde 18-32 mg/24s/kg, kadinlarda 10-25 32mg/24s/kg’dir.
Kreatinin klirensi:1 dakikada idrarla kreatininden temizlenen plazma hacmi olarak tanimlanir.
Kreatinin klirensi degeri glomeruler filtrasyon hizinin (GFR) bir gostergesidir.GFR, is goren glomerul sayisinin bir gostergesi olarak kabul edilir.
Kreatinin klirensi = Idrar kreatinin x dakikalik idrar hacmi
Serum kreatinin l
Kreatinin klirensi normal degeri= Kadin : 95 ± 20 ml/dk
Erkek : 105 ± 20 ml/dk.
Serum kreatinin duzeyi normal degeri= 0.6-1.2 mg/dl.
Serum kreatinin duzeyinin arttigi durumlar
1-Bobrek hastaliklari
2-Idrar yolu obstruksiyonlari
3-Akromegali
4-Gigantizm
5-Hipertiroidi
Serum kreatinin duzeyinin azaldigi durumlar
1-Kas distrofisi
2-Ileri yaslilik
3-Kas kitlesini azaltan kas erimeleri
4-Gebelik
Kreatinin Tayin Yontemleri
A-Kolorimetrik yontem (Jaffe yontemi)
B-Enzimatik yontem
Bugun laboratuvarlarda kreatinin olcumu otoanalizorlerde kinetik kolorimetrik assay (Jaffe metodu) ile olculmektedir.
Prensip:
Alkali ortamda pikrik asit ile kreatininin reaksiyona girerek sari-turuncu renkli kompleks olusturmasi ve bunun kolorimetrik olcumudur.
Jaffe yontemiyle kreatinin olcumu ve kreatinin klirensinin hesaplanmasi
Reaktifler:
1-%10 sodyum tungstat
2- 2/3 N sulfirik asit
3- 0.75 N NaOH
4-Doymus pikrik asit cozeltisi
Deneyin Yapilisi:
Kreatinin klirensinin saptanmasi icin kisiden sureli (2 saatlik,4 saatlik,24 saatlik v.s) idrar toplanir ve dakikalik idrar hacmi (V)saptanir.Idrar toplama suresinin ortasinda kan alinir. Idrar toplandigi sure boyunca cay ,kahve, ilac kullanilmaz.Idrar toplamaya baslamadan kisiye 1-2 bardak su icirilir.
Serumda kreatinin tayini
Numune Kor
Serum 4ml ¾
Distile su 2ml 6ml
%10 sodyum tungstat 2ml 2ml
2/3 sulfirik asit 2ml 2ml
Karistirilir 1-2 dk bekletilip suzulur.
N suzuntusu 3ml ¾
Kor suzuntusu ¾ 3ml
Pikrik asit 1ml 1ml
0.75 N NaOH 1ml 1ml
15 dk oda sicakliginda bekletilip kore karsi numunenin absorbansi 530 nm de okunur.Serum kreatinin konsantrasyonu (mg/dl) standart egri grafiginden saptanir.
Idrarda kreatinin tayini
Normal degerler: Erkek®14-26 mg/dl
Kadin®11-20 mg/dl
Deneyin Yapilisi:
Idrar 1:100 oraninda sulandirilir.(1ml idrar + 99ml distile su) 3ml sulandirilmis idrar alinir + 1 ml pikrik asit +1 ml 0.75 N NaOH konup karistirilir.15 dk oda sicakliginda beklettikten sonra kore (serumda kreatinin tayininde hazirlanan) karsi absorbansi olculur.Standart egri grafiginden idrar kreatinin konsantrasyonu (mg/dl) saptanir.Bulunan deger 20 ile carpilir.
Biyokimya Laboratuvarı
-
Serumda toplam protein tayini
-
Serumda bilirubin tayini
-
Serumda toplam lipid tayini
-
Yumurtalarla Ozmos Deneyi
-
Solunum Deneylerinde Kırmızı Lahana Kullanmak
-
Algler ve Su Kirliliği Deneyi
-
Bağ Üçgenleri- Van Arkel-Ketelaar Üçgenleri
-
Lipit Ekstraksiyonu ve Kolesterol Tayini
-
Total lipid tayini
-
Spektrofotometrik Yöntemle Kanda Glikoz Tayini
-
Otoanalizörde kalibrasyonu nasıl yapılır.
-
Bouın Solüsyonu
-
Formol kalsiyum solusyonu
-
Tamponlu Nötral Formalin Solusyonu
-
Formol Solusyonu hazırlanışı