Biyologlar - Biyolojiye Gerçekçi Yaklaşım

TEMELİNDE PİKRİK ASİT BULUNAN TESPİT SOLUSYONLARI

---

Bu tür solusyonlar iyi birer kuogulanttır. Pikrik asit iyi bir tespit edicidir. Parçalara hızlı nüfuz eder. Nüfuz eden pikrik asiti gidermek için yıkama yavaş ve zor olur. Pikrik asit tek başına asla kullanılmaz. Fakat bir çok karışımın bünyesine bir reaktif olarak iştirak eder.
A- Bouin fiksatifi
Sature (doymuş) pikrik asit …………………………..……………… 75 cc
(Doymuş pikrik ait = 1 gr pikrik asitin 86 cc saf suda eritilmesi ile hazırlanır)
Ticari formalin  ……………………………………………………… 25 cc
Glasiyel asetik asit …………………………….……………………… 5 cc
Tespit Süresi:  2-8 gündür. 3 gün tercih edilir.Uzun süreli tespitten sakınılmalıdır. Parçaların boyanması güçleşir.
Yıkama:  Total preparatlar için (Parafine dökülmeyecek) parçalar su ile yıkanır. Su birkaç kez değiştirilir. Parçalar % 70’lik alkolde 3 gün yıkanır. Bu süre içinde bouin’nin sarı rengi gidinceye kadar alkol değiştirilmelidir.
*** Parçalar parafin içine gömülecekse su ile yıkamadan kaçınılmalıdır.
Üstünlükleri: Parçaya çok iyi nüfuz eder. Parçalar 5 mm  kadar olabilir. Midokondriler hariç bütün hücresel organeller çok iyi korunabilir. Tüm boyalarla çok iyi boyanır.
Sakıncaları: Bağ dokusu şişer. Kan hücreleri iyi tespit edilemez. Bazı Anilin boyalarla dokular iyi boyanmaz. Bouin bilhassa bezler için iyi bir tespit solusyonudur. Böbreklerdeki subrenal bezleri iyi tespit eder.

b. Bouin – Allen solusyonu
Sature (doymuş) pikrik asit …………………………..75 cc
Formaldehit ………………………………………….25 cc
Asetik asit (kristal) ………………………………….. 5 cc
Kullanılacağı zaman 38 dereceye kadar ısıtılması gerekir. Sonra içine kristalize Kromik asit (1,5 gr) ilave edilir ve eriyinceye kadar sallanarak üzerine 2 gr üre konur.
Tespit Süresi :  37 derecelik etüvlerde solusyona parçalar konularak 1-3 saat kadar bekletilir.
Yıkama     :  % 70 ‘lik alkolle olur.
Üstünlükleri ve Sakıncaları : Bouin fiksatifindeki gibidir. Yalnız glikojeni  çok iyi tespit eder.

c- Bouin – Hollende fiksatifi
Bakır asetat (Nötr) ………………………………………………. 2,5 gr
Pikrik asit ………………………………………………………… 4 gr.
Asetik asit (kristal) ……………………………………………… 1,5 gr.
Formaldehit ………………………………………………….…. 10 cc
Saf su …………………………………………………………. 100 cc.
Bakır asetat porselen havanda iyice ezildikten sonra 100 cc saf su dökülür ve havan iyice çalkalanır. Bunun içine pikrik asit (4 gr) kristalleri ilave edilir. Şişe çalkalanarak bu kristaller eritilir. Sonra süzülür. Süzüntü içine Formol ile asetik asit konulur. İçinde asetik asit olmasına rağmen uzun süre kullanılabilir.

---