PROTEİNLERİN GÖSTERİMİ
Proteinler organizmada ya saf proteinler olarak veya karbohidratlar veya lipidlerle kombine olarak bulunurlar. Hayvansal dokulardaki proteinler basit proteinler ve konjuge proteinler olarak ikiye ayrılır.
Basit proteinler
Globuler Proteinler: Albumin, globulin, histonlar
Fibröz Proteinler: Kollajen, retikülin, elastin, keratin, fibrin
Konjuge proteinler:Nükleroproteinler, gikoproteinler ve lipoproteinler
Tüm basit proteinler, hidroliz ile aminoasitlerine ayrılırlar. Proteinler çekirdeklerde bulunur ve nükleoproteinler olarak adlandırılırlar. Dokularda en yaygın proteinler kollajen, retikülin, elastik ve keratin gibi fibröz proteinlerdir. Bunlar suda çözünmezler fakat albumin, globulin gibi basit proteinler suda çözündüklerinden gösterilmeleri daha zordur.
Proteinlerin Saptanması ve Boyanması:Proteinlerin ve protein içeren bileşiklerin boyanma reaksiyonları amino asit yapısına ve boyama çözeltisinin pH' sına dayanmaktadır. Eğer protein karboksil gibi asidik gruplu çok sayıda aminoasitlerden oluşmuşsa, bazik boyalarla boyanan bir asit protein olacaktır. Eğer çok sayıda amino grupları(-NH2) varsa asit boyalara affiniteye sahip bazik bir proteindir. Bazı amino asitler 1 amino ve 1 karboksil grubuna sahiptir ve nötral proteinlerdir. Buna benzer olarak yaklaşık eşit sayıdaki asidik ve bazik amino asitlere sahip proteinler de nötral olacaktır. Proteinlerin, asit veya bazik maddeler olarak iyonize olabilme yetenekleri ortam pH' sına bağlı olabilir. Boya çözeltisinin pH’sı, proteinlerin iyonize olmalarına izin verecek uygunlukta olmalıdır ki boyalarla birleşebilsin. Amfoterik boyalar veya doku bileşenleri, pH’larına bağlı olarak bazik veya asidiktirler. Bu faktörler, proteinlerin boyalarla boyanmalarında önemlidir. Fakat konjuge proteinlerin boyanma reaksiyonları karbohidrat veya lipit veya nükleik asit içeriğine de bağlı olacaktır.
Proteinlerin kusursuz histokimyasal reaksiyonları reaktif gruplarına bağlıdır. Bunlar bir amino asite veya bir tip proteine özgü değildirler. Amino grupları hemen hemen tüm amino asitlerde vardır fakat reaktif karboksil grupları, glutamik asit ve aspartik asit amino asitlerinde bulunur. Disülfit ve sülfidril grupları ise sistin, sistein ve metionin de bulunur.
Proteinlerin birçok bileşenden oluşmuş çok kompleks yapılar oldukları unutulmamalıdır. Bu yöntemler, proteinlerin yapısı hakkında çok az bilgi verirler. Ayrıca fiksasyon da korunmayı ve reaktif son grupların gösterimini etkileyebilir. Bu nedenle fiksasyon, yönteme uygun olmalıdır. Formalin fiksasyonu kısa olmalıdır ve osmiyum tetroksit zararlıdır, kullanılmamalıdır. Enzimler de spesifik aktiviteleri ile gösterilebilir. Immunglobulinler de doku kesitlerinde küçük hacimlerde olmalarına rağmen kesin olarak saptanabilirler. Antibodiler ve antijenler için immünofloresans ve immünoenzim yöntemleri uygulanabilir. Çok az miktardaki proteinler kesitlerde immünolojik teknıklerle gösterilebilir.
Histoloji
-
Endosülfan ve okratoksin-A’nın birlikte sıçanlarda toksisitesi: histopatolojik değişiklikleri
-
Histoloji Pdf Ders Notları
-
DEKALSİFİYE EDİLMEMİŞ KESİTLERİN HAZIRLANIŞI
-
DEKALSİFİKASYONU TEST ETMEK
-
KELATLAMA AJANLARI
-
ELEKTROLİTİK DEKALSİFİKASYON
-
ASİT DEKALSİFİKASYON SIVILARI
-
Histopatoloji nedir ?
-
KEMİK DOKUSU VE DEKALSİFİKASYON
-
MSS’DE DEJENERE MİYELİNİN GÖSTERİMİ
-
MARKSCHE’DEN BOYASI (Spielmayer, Benda)
-
MSS‘DE MİYELİNİN GÖSTERİMİ
-
KARIŞIK OLAN TEKNİK
-
BİELSCHOWSKY TEKNİĞİ
-
GÜMÜŞ ÇÖKTÜRME YÖNTEMLERİ