Biyologlar - Biyolojiye Gerçekçi Yaklaşım

Histoloji Preparatı Kesit alma işlemi

---

a) Kesilecek parafin bloğun biçilmesi ve tespit edilmesi:
Kesilecek parçayı içinde taşıyan parafin blok, düzgün kesit alınması için biçilmelidir.
Biçilme iyi ve dikkatli yapılmazsa iyi kesit alınmasına imkan yoktur.
Biçme jilet veya bistüri ile yapılır.
Dokunun durumu göz önüne alınarak blok dikdörtgen prizma veya küp biçiminde biçilir veya düzeltilir.
Bu sırada parçanın her tarafında eşit miktarda parafin kalmalıdır.  Parçaya çok yaklaşılmamalıdır.
Bundan sonra blok mikrotom tablasına tespit edilir. Mikrotom tablasının yüzü alevle ısıtılır ve üzerine çok az miktarda parafin konulup eritilir. Parafin soğuyunca tablanın yüzeyine yapışır. Bloğun buraya tespiti çok kolaydır. Bloğun kesilecek yüzeyi üstte getirilir ve alt tarafı tablanın yüzeyine değdirilir.
Spatül alevle ısıtılır ve tabla ile arasına sokularak hem tablanın hem de parafin bloğun alt tarafındaki parafinin erimesi sağlanır. Spatül aradan çekilince iki yüzey birbirine değdirilir ve yanlardan parafinle desteklenir. Soğutulur. Blok tablaya sıkıca tutturulmalıdır.  Aksi taktirde blok tabla üzerinden düşer.
Mikrotom tablası yuvasına yerleştirilir, kesit yönü ayarlanır ve vidası sıkılaştırılır.
b) Bıçağın tespiti:  Bıçak mikrotom gövdesi üzerindeki yerine yerleştirilir ve vidaları sıkılır.
Vidaların mikrotom üzerinde eşit basınç yapmasına dikkat edilmelidir.
Ayrıca bıçağın eğiminin kesit alma da önemi vardır. Bu eğim yeterli olmadığı zaman iyi kesit yapılmaz. Normalde bu eğim 150 olması iyi sonuç verir.
Daha az olması dokuyu ezer, daha fazla olması kesitlerin çevrilmesine neden olur. c) Kesitlerin yapılışı:
Bıçak yerine yerleştirildikten sonra parafin blok bıçağa 1 mm kadar yaklaştırılır. Bloğun alt yüzeyi ile bıçağın  keskin kenarının birbirine tam paralel olup olmadığına dikkat edilir.
Mikrotomda istenilen kalınlık ayarlandıktan sonra manivela kolu ne çok hızlı ne de çok yavaş olmadan, düzenli bir zaman aralığında çevrilir.
İlk kesitler yapılınca her şeyin yolunda olup olmadığına bakılır. Her şey yolunda ise kesit alınmaya devam edilir.
Şeridin uzunluğu 20-25 cm. kadar olunca şerit iki fırça yardımı ile  bıçaktan alınır. Temiz bir kağıt üzerine dizilir. Bundan sonra mümkünse hemen kesitler lam üzerine alınmalıdır.

---