Alg kültür ortamının zenginleştirilmesi, kullanılan besin ortamları
A. Makro elementler:
• Azot(N): Hücrede aminoasitlerin dolayısıyla proteinlerin yapımında rol oynar. Bu bakımdan önemli bir maddedir.
• Fosfor(P): Fitoplankton hücrelerinde ATP, nükleik asit, fosfolipidlerin yapısında yer aldığından önemli ve gereklidir.
• Karbon(C): Karbon taşıyan organik maddelerin kuru ağırlığının%50’si karbondur ve bu nedenle fitoplankton hücreleri fotosentez sırasında çok miktarda karbon tüketirler. Bu karbonda CO2’den sağlanır.
• Kalsiyum(Ca): Büyümeyi sağlayan önemli bir maddedir. Hücrlerin sitoplazmik membran ve çeper yapısının korunmasında rol oynar.
• Magnezyum(Mg): Enzimlerin oluşmasında rol oynar. Magnezyum eksikliği bazı organizmalarda hücre bölünmesini durdurur ve anormal hücreler oluşmasına yol açar.
• Sodyum(Na) ve Potasyum(K): Büyümeyi doğrudan etkilerler. Potasyum azlığı büyüme yanında fotosentezide engeller.
B. Oligo Elementler
• Demir (Fe) ve Mangan (Mn): demir eksikliğinde organizmanın fotosentez hızı düşmektedir. Manganın ise fazla yoğunlukta olması(1 mg/l) gelişmeyi yavaşlatır.
C. İz Elementler:
• Çinko, bakır, kobalt ve molibden gibi metaller olup az miktarları yeterlidir. Aşırı miktarları ölüme neden olur.
D. Vitaminler:
• Suda eriyebilen üç tür vitamin çok önemlidir. Bu vitaminler B12(Cyanocobalamine), B1(Thiamin) ve Biotin’dir.
Besleyici solüsyonlar
• Tek hücreli deniz alglerinin laborratuar kültüründe kullanılan besleyici solüsyon; Erdschreiber solusyonundan yarı sentetik solüsyona ve hatta tam sentetik solüsyona kadar değişiklik gösterir.
• Yarı sentetik ve sentetik solüsyonlarda kullanılan EDTA ve metal tampon görevini yürütür.
• EDTA, sentetik solüsyonda iyi bir alg üretimi için kullanılan ağır metal miktarlarının neden olacağı toksiteyi önler.
• Erdschreiber solüsyonundaki toprak ekstraktı humik asit içerir ve sentetik besleyici solüsyonda kullanılan EDTA’nın görevini yürütür.
a. Erdschreiber besleyici solüsyon
• 5l denizden alınan yeni alınmış deniz suyu (filtre edilmemiş)
• 20 cc distile su içinde 0.5g NaNO3 ve 0.1g Na2HPO412H2O eritilmesiyle hazırlanan solüsyona katılır
• En fazla 90℃’ye kadar ısıtılır.
• Bu solüsyonun bir litresine 25 cc toprak ekstraktı ilave edilir.
Toprak ekstraktının hazırlanması
• Toprak ekstraktın da kullanılacak olan toprağın balçık ve humuslu olması istenmez. Aynı şekilde bu toprağın yakın bir geçmişte ticari yapay yada organik gübrelerin eklenmemiş olması istenir.
• 1. metod: (deniz algleri için)
• Föyn metoduna göre 1kg uygun bahçe toprağı 1kg distile su ile birlikte otoklavda 1 saat kaynatılır.
• 2-3 gün sonra karışım çöker.
• Çöken kısmın üstünde kalan kısım ayrılarak yeniden sterilize edilir.
• Kahverengi-sarımsı renkli bu sıvı buzdolabında birkaç hafta tutulur ve berraklaşınca kullanılır. 103
• 2. metod: (deniz algleri için)
• Bu metotda Soxhalet aparatı toprak ekstraktının hazırlanmasında kullanılır.
• Bu amaçla 65cc toprak içeren bir erlenmayer 1 saatte 750cc su ile ekstrakte edilir.
• Neticede geriye kalan koyu kahverengi sıvı yeniden kaynatılarak kullanılmaya hazır hale
gelir.
• 3.metod: (tatlısu algleri için)
• 1kg gübresiz bahçe toprağı 2l çeşme suyu ilave edilerek 1 saat kaynatılır.
• Kaynatılan toprak 1 gün çökmeye bırakılır. Üstte bulunan koyu renkli su diğer bir kaba ayrılır ve altın sarısı bir solüsyon elde edilinceye kadar aynı işlem 3 gün boyunca tekrar edilir.
• Her kaynatmadan sonra kabın oda sıcaklığında soğutulması sağlanır.
• Her iki kaynatılma işleminden sonra 18 saatlik bekleme sonrasında sıvı kısım, tabana çöken kısımdan ayrılır.
• Eğer toprak ekstraktı ufak hacim için yapılacaksa, test tüpü veya şişe şeklindeki kabın tabanına 0,65-1,5cm bahçe toprağı konur.
• Tüp yada kabın ¾’ü dolana kadar distile su ilave edilir. Tüpün ağzı pamuk, plastik yada metal tıpa ile kapatılır.
• 1-1,5 saat birbirini takip eden 3 gün kaynatılır. Önemli olan nokta 100℃de kaynatılmış olmasıdır.
• Her kaynamadan sonra kaplar oda sıcaklığında soğutularak, sıvı kısım tabanda çöken kısımdan ayrılarak, altın sarısı renk elde edilinceye kadar devam eder.
b. Yarı sentetik ve tam sentetik besleyici solüsyonu
• Kültürü yapılacak olan alg türünün ihtiyaçları doğrultusunda kültür vasatları hazırlanıp kullanılmaktadır.
• Yarı sentetik vasatlara deniz suyu kullanılırken tam sentetik vasatlarda distikle su tercih edilir.
Hazırlayan:YRD. DOÇ. DR. ERTAN ERCAN
BİYOLOJİ ÖDEV YARDIM
-
Mercanlar ve Mercan resifleri hakkında bilgi
-
Kulak Nedir? Kulağın Yapısı ve Görevleri Nelerdir?
-
Göz nedir ? Gözün görevleri nelerdir ? Canlılarda göz ve görme organı
-
Boğaz nedir ? Boğazın kısımları nelerdir ?
-
Omurga, columna vertebralis nedir ? Görevleri nelerdir ?
-
Doğal gübreler nelerdir
-
Kimyasal (yapay) gübreler nelerdir
-
Kortizol Nedir
-
Semantik Nedir ?
-
Karasal Ve Sucul Biyomların Özellikleri Nelerdir ?
-
Kaç çeşit biyom vardır
-
Bitki Ve Hayvanların Yeryüzündeki Dağılımını Etkileyen Faktörler Nelerdir?
-
Bitkisel dokular hakkında bilgi
-
Ekosistemde besin zinciri ve besin ağının önemi nedir ?
-
Genetik Algoritmalar