L. lactis’ten Kromozomal DNA İzolasyonu
Kromozomal DNA Lactococcus lactis subsp. lactis suşundan Lewington ve ark. 1987 metodunda bazı değişiklikler yapılarak izole edilmiştir. 16 saat inkübe edilmiş besi kültürü 4000 devir/dk 10 dakika santrifüj (J.P. Selecta) edilerek bakterilerin çöktürülmesi sağlanmıştır. Çöktürülen bakterilere 120μl solüsyon I: (25 mM sükroz, 0.5M Tris.HCl (pH 8.0)) eklenerek çözdürülmüştür. 25μl lizozim (5mg/ml) eklenerek, 37oC’de inkübe edilen %20’lik SDS’den 75μl eklenmiştir. Bunu takiben 40μl NaAc ve 400μl %100’lük etanol eklenmiştir ve 30 dakika -20oC’de bekletilmiş, 15000 devir/dk 15 dakika santrifüj edilerek hücreler çökeltilmiştir. Bunu takiben elde edilen süpernatanttan DNA’nın temizlenmesi ve çöktürülmesi için %70’lik etanol eklenmiştir. Etanolü DNA’dan uzaklaştırmak için 15000 devir/dk 3 dakika santrifüj edilmiştir ve DNA 50μl dH2O içerisinde çözdürülerek -20oC’de saklanmıştır.
Genetik
-
İnsanlarda Kaç Kromozom Vardır?
-
Sık görülen mikrodelesyon sendromları nelerdir?
-
Bilim insanları kromozomları nasıl inceler?
-
Arkea'da Kromozomlar ve DNA Replikasyonu
-
DNA Onarım Mekanizmaları Nelerdir?
-
DNA hasarına neden olan etkenler nelerdir?
-
XYY Süper Erkek Sendromu - JACOB’S, Sendromu
-
Bitki doku kültürü çalışmaları ile haploid bitkiler elde edilebilir
-
Gram pozitif bakterilerden genomik DNA izolasyon protokolü
-
E. coli bakterisinden genomik DNA izolasyon protokolü
-
DNA’nın Keşfi
-
İnsan Genom Projesi Nedir ? Amaçları Nelerdir ?
-
Genomik mikrodizilimlerle ikilenme teşhisi yöntemi
-
Gen duplikasyonu ve amplifikasyonu nedir?
-
DNA ile RNA Arasndaki Farklar ve Benzerlikler Nelerdir