EMB (EOZİN METİLEN BLUE) BESİ YERİ
Besiyerinin içerdiği boyalar gram olumlu, bir kisim gram olumsuz bakterilerin üremelerini inhibe eder. Özellikle Enterobakteriaceae ve benzeri bakterilerin ayirt edilmesinde kullanilan ayirtici bir besiyeridir. Laktoz veya sukroz üzerine etki eden bakteriler asit oluştururlar. Boyalar bu ortamda presipite olurlar. Sonuç olarak E.coli gibi tipik laktozu fermante eden bakteriler madeni parlaklik veren yeşil, siyah koloniler yaparlar. Salmonella, Shigella, Proteus gibi şekeri fermante etmeyenler saydam, renksiz koloniler oluştururlar.
Besiyeri içerisinde; Pepton 10 gr.
Laktoz 5 gr.
Sukroz 5 gr.
K2HPO4 2 gr.
Agar 13.5 gr.
Eozin Y 0.4 gr.
Metilen blue 0.065 gr.
Saf su 1000 ml. Maddeler kariştirilir. Kaynatilarak eritilir. 121°C de 15 dk. otoklavlanir. pH 7.1 e ayarlanir. Plaklara dökülür.
Aşağıda görüldüğü gibi bu besiyerinde protein, buffer, boyalar, agar ve iki karbonhidrat bulunmaktadır. Eozin Y ve metilen mavisi birçok gram pozitif bakteriler için inhibitördür. Grarn negatif basillere karşı ise ya daha az toksik veya etkisizdir. Gram negatif basillerin ayırdedilmesi, laktoz fermentasyonu yoluyladır. Tipik olarak laktoz fermentasyonu yapan Gram negatif basiller için alternatif karbonhidrat kaynağı olarak ortama sükroz eklenir. Çünki Gram negatif basiller bazen laktozu fermente etmez veya yavaş fermente etmektedir. Bu besiyerine ekilen bakterilerin renkli koloni teşkil etmeleri iki faktöre bağlıdır. Bunlardan birincisi laktoza tesir eden bakterinin kafi düşüklükte pH teşkili i1e her koloninin boya bileşiğini alması, ikincisi ise bakteri kolonileri tarafından alınan boya bileşiğini yapmak üzere eozin (bir asid boya) ile metilen mavisinin (bir bazik boya) reaksiyona girmesidir. Laktoza tesirsiz bakteri kolonileri renksizdir. Şeftaf görünür. Laktoza tesir eden (E. coli gibi) bakteri kolonileri koyu renklidir. EMB agar da E. coli için tipik olan koloniler merkezi koyu renkte yeşilimsi, parlak metalik renkte kolonilerdir. Laktoz ve sükroz fermentasyonu yapan bakteri kolonilorindeki bu koyu pigmentasyon, boya çökeltisi olup muhtemelen "methylene blue-eozinat"tır. Karbonhidratları fermentasyona uğratan bakteri kolonileri etrafında düşük pH (asid reaksiyon) meydana gelmesinin sonucu boya çökeltileri meydana gelmektedir. Bu boya çökeltileri şüphesiz koloni içine absorbe olmuştur. Fermentasyon yapmayanlar, muhtemelen proteinlerin oksidatif deaminasyonu nedeniyle yüzeyde pH'ı artırırlar. Böylece metilen mavisi eozin kompleksi çözülür ve renksiz kolonilere sebep olurlar.
Pepton 10 gr
Laktoz 5 gr
Sükroz 5 gr
Dipotasyum fosfat 2 gr
Eozin Y 0.4 gr
Metilen mavisi 0.065 gr
Agar 13.5 gr
Distile su 1000 ml
Levine EMB Agar
In vitro (canlı hücre dışında) yapılan standart mikrobiyolojik analizlerde E. coli ve diğer Enterobacter türlerinin izolasyon ve ayrımı ile Candida albicans 'ın hızlı tanımlanması için selektif katı besiyeri olarak kullanılır.
Bileşim
Peptone 10,0 g/L; Lactose 10,0 g/L; K2HPO4 2,0 g/L; Eosin yellowish 0,4 g/L; Methylene blue 0,065 g/L; Agar-agar 13,5 g/L
Etki şekli
Bileşimdeki boyalar, pek çok Gram pozitif bakterinin gelişimini baskılar. Koagülaz pozitif stafilokoklar karakteristik renksiz ve toplu iğne başı büyüklüğünde koloni oluşturarak gelişirler ve bunlara koagülaz testi uygulanabilir. Koliform grup bakteri analizinde yayma ya da sürme ile inoküle edilen Petri kutuları aerobik olarak 35 oC'da 1-2 gün inkübe edilirken, Candida analizi %10 CO2 atmosferinde yapılır.
Mikrobiyoloji
-
Antibiyotiklerin Etki Mekanizmaları Nelerdir?
-
Azot oksit
-
Petri Kutusunda Agarlı Besiyeri Hazırlanması
-
Tüpde Agarlı Besiyerlerinin Hazırlanması
-
Besiyeri Hazırlarken Dikkat Edilecek Hususlar Nelerdir ?
-
Dehidre Besiyerleri Nedir?
-
Besiyerinin Sahip Olması Gereken Özellikler
-
Besiyeri hazırlanmasında kullanılan maddeler nelerdir ?
-
Besiyerlerin Sınıflandırılması Nasıl Yapılır ?
-
Besiyerinin Tanımı ve Kullanım Amaçları Nelerdir ?
-
Pseudomonas Cinsine ait Türler
-
Veba - Yersinia Pestis
-
Tularemi - Francisella tularensis
-
Şarbon - Bacillus anthracis Enfeksiyonu
-
Bruselloz - Brucella spp